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PCR的黄金搭档——Taq DNA聚合酶

2022-08-26 16:33:31

  PCR(聚合酶链式反应)是由美国PE-Cetus公司发明的一种体外促进特异性DNA片段合成的生物检测技术,广泛应用于生物科学研究领域中。

  PCR技术主要有①高温变性:在94℃的温度下促使提取的原始DNA双链(模板)及扩增得来的双链DNA解离,成为单链,为后续扩增做准备;②低温退火复性:在55℃的条件下,解开的DNA单链与上下游引物结合;③适温延伸:DNA模板-引物结合物在Taq DNA聚合酶的作用下,以dNTP为原料,顺着引物继续延伸生成一条与模板DNA配对的复制链这三个基本步骤。这三个步骤周而复始、不断循环,上一循环生成的新DNA链又成为下一次循环的模板,短时间内就能将目的基因扩增几十万甚至几百万倍!

  如此精妙的生物科技手段一度让科学家们犯了难,PCR技术对温度的严格要求对各反应原料都提出了挑战,尤其是DNA聚合酶,因为大多数酶都在高温时变性失活。DNA聚合酶相当于“针线”,将一个个单独的核苷酸“缝”在DNA模板链上。最开始时PCR反应使用的酶是从大肠杆菌中分分离的Klenow酶,虽然耐热,但是不耐高温,每个循环都要重新添加一次酶,严重阻碍了PCR技术的普及推广,直至在一种水生栖热菌中提取出Taq DNA聚合酶,这种酶在90℃以上仍能保持活性,变性温度在95℃20秒的情况下,50个循环后保有50%的酶活性,所以称它为PCR反应的“黄金搭档”也不为过。

  河北三狮生物科技有限公司研制生产的2×Taq PCR Master Mix(Taq酶预混液),科学配比添加了DNA Ploymerase、PCR Buffer及dNTP Mix等多种PCR原料,有含染料与不含染料(电泳时所必需的色素试剂)两种供您选择,您只需要添加模板、上游引物、下游引物和dd水便可进行PCR反应,灵敏度高,特异性强,线性范围广,简单方便。


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