盐城市实时荧光定量PCR仪标准

在动物疫病诊断标准等技术规范中，酶联免疫吸附试验对试验中加底物的反应步骤进行规定，规定固定的时间，然后加终止液。但是，在许多酶联免疫吸附试验中，加底物的反应步骤需要根据阴性、阳性对照反应情况对反应的时间进行调整。如当阴性与阳性对照的反应结果出现后，实验人员则可以加终止液。有关资料规定的时间可能太长或者太短，这样会对反应的结果产生影响。如果加底物的反应时间较长，样品则有可能呈现阳性，易导致误诊情况的产生。

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动物疫病诊断的主要内容有:一是对血、 尿、粪等进行临床常规化验;二是从流行病学角度，调查研究动物疫病流行情况，主要调查动物发病时间及地点、疫病蔓延情况、疫情来源及传播的途径与方式等;三是从病理学方面，剖检因忠传染病而死亡的畜禽尸体，查看其病理变化，或者取病料进行送检，再进一步做病理组织学方面的诊断;四是从微生物学角度，检查、坚定从患病的畜禽病料当中分离并且培养出来的病原微生物，或者是进行动物接种试验等，五是从免疫学角度，对组织或者细胞的变态反应、细胞的免疫功能及血清学反应等进行诊断。

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动物防疫动物疫病的预防、控制、扑灭及动物和动物产品的检疫。狭义的动物防疫，是为了预防某种动物疫病，对所饲养的动物进行针对性地接种疫苗后，产生一种明显针对该种疫病的免疫力，也就是通过打预防针而预防动物疫病的发生。疫病预防指采取一切手段将某种传染病排除在一个未受感染动物群之外的防疫措施。通过多种隔离设施和检疫措施阻止某种传染病进入一个尚未被污染的地区；或通过免疫接种、药物预防和环境控制等措施，保护动物免遭疫病危害。

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选择灵敏度高的热启动Taq酶。一般说，Taq酶的扩增效率高，灵敏度就高，但也有不一致的情况。如果要扩增的样本目标基因丰度较低，建议对Taq酶的扩增灵敏度进行检测。常见的检测方法是将目标基因质粒片段进行10倍或5倍梯度稀释，在较低的几个稀释度进行PCR检测，选择检测灵敏度较高的热启动Taq酶。目前国内市场上常用的ABI、Bioline、Biog的扩增灵敏度都比较高，但知名品牌T的灵敏度略低，研究者可根据自身的实验要求进行选择。

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大部分分子诊断实验室的核心技术都主要集中在检测特异性、相对较短的DNA或RNA片段上。该技术能诊断传染性疾病、鉴别影响药物代谢的特殊基因变异型或检测与疾病有关的基因，如与癌症有关的基因。这些检测的核心是实时定量聚合酶链反应（PCR）、转录调节扩增（TMA）、靶向扩增和信号扩增等类似技术的应用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛细电泳法的凝胶法都是分子诊断实验室的关键技术，但他们通常还包括检测过程中的扩增步骤。为了能顺利应用那些采用DNA和RNA来诊断疾病的检测，分子诊断实验室须要使用定义明确的工作流程，从而得到稳定的、有效的结果，而当前已存在能帮助诊断实验室实现每个工作流程流水化的特殊工具。