衡水市实时荧光定量PCR仪优势

加强技术指导。中国动物疫病预防控制中 心要制定国家动物疫病强制免疫技术指南，组织开展省级免疫技术师资培训。国家兽医参考实验室、专业实验室、区域实验室和各省份动物疫病预防控制中 心要持续跟踪病原变化和流行趋势，为各地免疫方案的制定、疫苗的选择和更新提供技术支撑。各省份要组织做好乡镇动物防疫机构、村级防疫员及社会化服务组织的免疫技术培训。疫苗及诊断试剂供应企业要做好培训、技术服务等工作。

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常规普通PCR常见问题：1. 优化反应条件，梯度摸索退火温度，延长退火延伸时间，增加反应循环数（30-45区间为宜）。2. 对核酸模板进行纯化，或使用商业化核酸提取试剂盒进行提取，增加核酸模板的上样量。3. 优化反应体系（预混体系除外），改变检测体系中的Mg2+浓度及dNTPs用量，更换体系中Buffer。4. 重新设计引物，避免引物二聚体和链内二级结构，在一次稀释引物后可分装成多支小管，减少反复冻融次数。

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在动物疫病诊断中，化验室的操作较为关键，对诊断的结果有直接的影响。但是，在当前实验室操作中还存在一-些问题，如检测操作中、检测报告中未填写、不开具《检测委托书》等这些问题的存在严重影响动物疫病的诊断，不利于动物疫病的防控。因此，在今后工作中，需要对相关工作制度进行不断地完善，促使化验室的操作更加规范化、科学化;加强对实验室人员的专业培训，提高其操作水平。只有这样才能提高动物疫病检测的准确性，为我国的动物疫病防控工作做好铺垫。

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Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强，PCR扩增的指数增长期越长，‘S型’曲线更加典型，荧光信号值更高，而且更适合做多重PCR检测。我们曾比较过多家公司的热启动Taq酶，在国外品牌中，英国Bioline公司的热启动Taq酶，酶动力较好，可做4重PCR，等量起始模板CT30时的荧光信号值高。在国内品牌中，BIOG热启动Taq酶的指数期较长，可做3重PCR，且扩增曲线的‘S’型不受影响，其它的国产品牌一般只能支持2重反应，在做3重反应时，扩增曲线低矮，荧光信号值较低，无典型扩增曲线，结果很难判定。

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热启动Taq酶产品优势;1. 灵敏度高：可直接扩增1个拷贝的支原体DNA。2. 化学修饰，无动物性DNA污染。3. 性价比高：相对市面上zui常用的热启动聚合酶性价比更高。4. 扩增效率高：荧光定量PCR起峰快，Ct值低，扩增效率高。5. 可重复性高：荧光定量PCR扩增曲线重合度高，受干扰影响少。热启动Taq酶应用：1. 热启动PCR 2. 荧光定量PCR 3. DNA序列测定4. TA cloning.