南京市实时荧光定量PCR仪应用

强化监督检查。中国兽医药品监察所要加强疫苗质量监管工作，开展监督抽检，对生产企业实行督导检查。各级农业农村部门要加强对辖区内强制免疫疫苗生产企业的监督检查，督促生产企业严格执行兽药生产质量管理规范（GMP）。实施兽药“二维码”管理制度，加强疫苗追踪和全程质量监管，严厉打击制售假劣疫苗行为。对拒不履行强制免疫义务、因免疫不到位引发动物疫情的单位和个人，要依法处理并追究责任。

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常规普通PCR常见问题：1. 优化反应条件，梯度摸索退火温度，延长退火延伸时间，增加反应循环数（30-45区间为宜）。2. 对核酸模板进行纯化，或使用商业化核酸提取试剂盒进行提取，增加核酸模板的上样量。3. 优化反应体系（预混体系除外），改变检测体系中的Mg2+浓度及dNTPs用量，更换体系中Buffer。4. 重新设计引物，避免引物二聚体和链内二级结构，在一次稀释引物后可分装成多支小管，减少反复冻融次数。

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人们生活水平不断提升,对食品质量安 全提出更高的要求,检疫工作不断深入与完善,仅依靠感观检查已远不能满足当今工作的需要,须使病理化验室发挥的作用.为更好地配合产地检疫,屠宰检疫及农贸市场的肉食品检疫,根据《动物防疫法》,《食品卫生法》,《定点屠宰管理办法》及相关法律法规的精神,结合实际工作需要,高度重视动物的防疫工作.而动物疫病的诊断离不开先进的技术和设备,该文主要围绕动物疫病诊断化验室操作中常见的问题进行分析.

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传染病的有关概念传染:传染是在- -定的外界条件下，动物机体与侵入体内的病原微生物相互斗争所表现的不同程度的感受过程。病原微生物在动物机体内一定部位定居、繁殖，引起机体产生- - 系列病理反应的过程。呈现出一- 定的临床症状的传染称为显性传染。反之，如果动物不显临床症状，称为隐性传染。传染病:凡是由病原微生物引起，具有--定的潜伏期和临床表现，并具有传染性的疾病称为传染病。败血症:病原体在机体的局部感染后，不断繁殖并进人血液，在f血液中继续繁殖，产生毒素，引起各实质器官的严重病变与全身反应的综合征。

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分子诊断主要是应用分子生物学方法检测生物体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术。由于分子诊断可以从基因层次进行检测，因此检测灵敏度和准确性的优势较为明显，可在感染初期识别病毒或者提早确认基因缺陷，从而提供个性化的医疗诊断服务，主要应用于遗传病、传染性疾病、肿瘤等疾病的检测与诊断。分子诊断主要包括 核酸诊断 和 生物芯片技术 。

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全球，虽然只有少数的芯片可用于临床诊断，但国内基因芯片技术已经处于世界领 跑的地位。基因芯片技术将是荧光定量PCR 检测技术具挑战的潜在对手，主要是：荧光定量PCR 技术一次只能检测一个或几个目标基因，而基因芯片技术可以实现对大量目标基因的同时检测。随着人类基因组计划的进展，基因芯片在国内外已成为研发热点。若基因芯片技术迅速成熟并大规模产业化，将对荧光定量PCR 检测产生较大的冲击。不过，基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷，主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因，预计荧光定量PCR 检测技术在今后5 到10 年内可保持前锋。