宁波市分子诊断试剂原材料优质
发布时间:2023-07-23 01:27:17宁波市分子诊断试剂原材料优质
由于应用领域广泛,分子诊断行业在全球得到了飞速发展。随着靶向治疗逐渐成为肿瘤准确治疗的重要方法,释放更多肿瘤个性化用药检测(伴随检测)需求。新靶向药不断推出和个性化用药检测渗透率提升,推动了个性化用药检测行业的快速发展。基因测序已在无创产前检测(NIPT)大规模应用,并基于全 面二孩政策推动需求快速增长。未来随着技术进步和成本下降,基因测序在肿瘤早筛和个人基因组检测领域中应用前景更广。
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Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强,PCR扩增的指数增长期越长,‘S型’曲线更加典型,荧光信号值更高,而且更适合做多重PCR检测。我们曾比较过多家公司的热启动Taq酶,在国外品牌中,英国Bioline公司的热启动Taq酶,酶动力较好,可做4重PCR,等量起始模板CT30时的荧光信号值高。在国内品牌中,BIOG热启动Taq酶的指数期较长,可做3重PCR,且扩增曲线的‘S’型不受影响,其它的国产品牌一般只能支持2重反应,在做3重反应时,扩增曲线低矮,荧光信号值较低,无典型扩增曲线,结果很难判定。
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热启动PCR(hot start PCR)是指使Taq DNA 聚合酶只有在样品温度至少超过70℃时才发挥作用的PCR,可提高反应的特异性。Taq DNA 聚合酶通常在比适宜温度低得多的条件下仍有较强的活性。PCR 反应的初加热过程中,样品温度上升到70℃之前,在较低的温度下引物可能与部分单链模板形成非特异性结合,并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。结果会导致非靶序列的扩增,影响反应的特异性。热启动可减少非靶序列的扩增,提高反应的特异性。在引物设计时如果某位点因为遗传元件的定位而受限,如site-directed 突变、表达克隆或用于DNA 工程的遗传元件的构建和操作等情况,热启动PCR 尤为有效。
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热启动Taq酶产品优势;1. 灵敏度高:可直接扩增1个拷贝的支原体DNA。2. 化学修饰,无动物性DNA污染。3. 性价比高:相对市面上zui常用的热启动聚合酶性价比更高。4. 扩增效率高:荧光定量PCR起峰快,Ct值低,扩增效率高。5. 可重复性高:荧光定量PCR扩增曲线重合度高,受干扰影响少。热启动Taq酶应用:1. 热启动PCR 2. 荧光定量PCR 3. DNA序列测定4. TA cloning.